Oplysninger om fremstilling af kolloidale guldopløsninger til antigen -testen

Fremstilling af en kolloidal guldopløsning til antigen -testen vedtager trisodiumcitratreduktionsmetoden til at fremstille en kolloidet guldopløsning. Tag 1000 ml ultrapurvand og opvarm det til kogning på en magnetisk omrører, tilsæt 40 ml 1% chloroaurinsyreopløsning, når opløsningen koger igen, tilsættes hurtigt 36 ml 1% trisodiumcitratopløsning, fortsæt med at koge, når farven på opløsningen vender Purple 5min, sluk for varmen og gendanner til den originale volumen med ultrapure -vand efter køle. Den gennemsnitlige diameter og Zeta -potentiale for kolloidale guldpartikler blev målt med en analysator for nanopartikelstørrelse og opbevaret ved stuetemperatur i mørke. Så hvad er oplysningerne om fremstilling af kolloidale guldopløsninger til antigen -testen? Lad os tage et kig.

Her er indholdslisten:

l Fremstilling af kolloidalt guldmærket konjugater

l Fremstilling af hurtige antigen -teststrimler

l Minimumsdetektionsgrænse

l stabilitetstest

Forberedelse af kolloidalt guldmærket konjugater

Tag 100 ml antigen-test kolloidalt guld i henholdsvis to rene bægerglas i henhold til de optimerede markante pH-betingelser, tilsættes 3,3 ml og 2,1 ml 0,1 mol/l kaliumcarbonat for at justere pH, omrør med en magnetisk omrører ved 300 r/min i 10 minutter, og tilsæt musen anti-N-protein monoclonal antibody og dnp-bsa prtotein var hver 1 mg And Rør af 15 minutter; 2 ml 10% BSA -opløsning blev tilsat, og 2 ml 10% BSA -opløsning blev tilsat, og omrøringen blev fortsat i 20 minutter; Efter omrøring blev antigen -testkolloidal guldopløsning overført til to 50 ml centrifuge -rør, indstilling af centrifuge -parametrene var 9000 r/min, 20 minutter og 4 ° C, og centrifugering blev udført. Efter centrifugering skal du tage centrifuge -røret omhyggeligt, ikke ryste, fjerne supernatanten med en pipette, opsamle bundfaldet, rekonstittere det med konjugeret fortyndingsmiddel til 10 ml og opbevare ved 4 ° C i mørke. Den gennemsnitlige diameter og zeta -potentialet for antigen -testkolloidalt guldkonjugatpartikler blev målt ved en analysator for nanopartikelstørrelse.

Fremstilling af hurtige antigen -teststrimler

Prøvepuden var ensartet coatet med prøvepude -behandlingsopløsningen, og belægningsmængden for hver glasfiber var 30 ml og tørret ved 50 ° C i 24 timer. Dilute the rapid Antigen test colloidal gold-labeled mouse anti-N protein monoclonal antibody and colloidal gold-labeled DNP-BSA protein conjugate with conjugate diluent, the volume ratio is 18% and 20%, respectively, and treat with the diluted colloidal gold conjugate the coupler pad was uniformly coated with liquid, the coating amount of each glass fiber was 30 ml, og det blev tørret ved 45 ° C i 24 timer. Mus-anti-N-proteinmonoklonalt antistof og kanin-anti-DNP-polyklonalt antistof blev fortyndet med PBS indeholdende henholdsvis 0,01 mol/L PH7,4 og 5% trehalose til koncentrationen på 2,0 mg/ml og 1,0 mg/ml. Som detektionslinje (T -linje) og kvalitetskontrollinjen (Cline) blev indfangningsantistoffet coatet på en nitrocellulosemembran (NC -membran) og tørret ved 45 ° C i 48 timer. Den forberedte NC-film, konjugatpude, prøvepude og vandabsorberende pude blev indsat på PVC-bundpladen på sin side, skåret i 3 mm/stribe med en spalte, sat i en kortkasse og pakket i en aluminiumsfoliepose. Under testen skal du indsætte nasopharyngeal-pinden i løftøret, der er fyldt med ekstraktionsopløsningen (10mmol/LPBS, PH7,4, 1%NP-40), og tilsæt 3 dråber (100 uL) dråbevis til prøvekortet på testkortet efter ekstraktion i 15S. 15 minutters reaktionstid til visuel fortolkning. Antigen Test T Line og Cline er begge positive, T-linjen er ikke farvet, Cline er negativ, Cline er ikke farvet, hvilket indikerer, at teststrimlen er effektiv, og den skal testes igen.

Minimum detektionsgrænse

Minimumsdetektionsgrænseundersøgelser blev udført med varme-dræbte viruskulturer. Eluatet fra nasopharyngeal pinde fra raske mennesker blev brugt som den negative matrix til antigen -testen. Først blev der udført en 10 gange gradientfortynding. Efter det negative resultat af den hurtige antigen-test var den forrige koncentration derefter 2 gange gradientfortynding, og ikke mindre end 19 gange ud af 20 test var positive. Koncentrationsniveauet (≥95%) blev anvendt som minimumsdetektionsgrænsen for reagenset.

Stabilitetstest

Placer den forberedte antigen -test færdige reagenskort i en ovn på 50 ° C, og test med høje og lav koncentrationskvalitetskontrolstoffer hver anden uge. Gentag testen 3 gange for hver prøve. Forskellen i bånddybden mellem den høje temperatur accelererede destruktionsreagens og kontrolreagenset i 1 uge og 8 uger.

Ovenstående er de relevante oplysninger om fremstillingen af den kolloidale guldopløsning til antigen -testen. Hvis du er interesseret i Covid-19 Rapid Antigen-testen , SARS-CoV-2 Rapid Antigen-test, kan du kontakte os. Vores hjemmeside er www.bioteeke.cn.