Introduktion til PCR -maskiner

PCR -maskine , også kendt som PCR -genamplifikationsinstrument, PCR -amplifikationsinstrument, polymerasekædereaktion nukleinsyre amplifikationsinstrument, er et instrument, der forstærker specifikt DNA ved anvendelse af PCR (polymerasekædereaktion) teknologi. PCR -maskine er vidt brugt i medicinske og biologiske laboratorier, såsom til at bestemme, om et testlegeme vil udvise PCR -maskiner, der er vidt brugt i medicinske og biologiske laboratorier, for eksempel for at bestemme, om en testorganisme udviser en genetisk sygdomsprofil, til at diagnosticere infektionssygdomme, til at replikere gener og til at identificere parentage. Hvad er en PCR -maskine?

Her er indholdslisten:

l Den grundlæggende struktur af en PCR -maskine

l Arbejdsprincip for PCR -maskine

l Reaktionskinetik af PCR -maskiner

Den grundlæggende struktur for en PCR -maskine

En PCR -maskine består normalt af en varm coverdel, en termisk cyklusdel, en transmissionsdel, en kontroldel og en strømforsyningsdel osv.

Arbejdsprincip for PCR -maskine

Arbejdsprincippet for PCR-maskinen svarer til den naturlige replikationsproces af DNA, hvis specificitet afhænger af oligonukleotidprimere, der komplementerer til begge ender af målsekvensen, og består af tre grundlæggende reaktionstrin: denaturering-annealing-udvidelse.

1. Denaturering af skabelon -DNA

Skabelon-DNA opvarmes til ca. 93 ° C i en bestemt tid til at dissociere den dobbeltstrengede skabelon-DNA eller det dobbeltstrengede DNA dannet af en PCR-maskine for at gøre det enkeltstrenget, så det kan binde til primerne som forberedelse til den næste reaktionsrunde.

2. udglødning (denaturering) af skabelon -DNA og primere

Efter at skabelon-DNA er denatureret til enkeltstrenget ved opvarmning, sænkes temperaturen til ca. 55 ° C, og primere er parret og bundet til den enkeltstrengede komplementære sekvens af skabelon-DNA'et.

3. Udvidelse af primere

DNA-skabelon-primerkonjugatet syntetiseres under virkningen af taqDNA-polymerase ved anvendelse af DNTP som reaktionsmateriale og målsekvensen som skabelonen til at syntetisere en ny semi-konserveret replikeret streng komplementær til skabelon-DNA-strengen i henhold til princippet om baseparring og semi-konserveret replikation.

Ved at gentage denaturerings-annealing-udvidelsesprocessen kan der opnås mere 'semikonserverede replikatkæder ', og disse nye kæder kan bruges som skabeloner til den næste cyklus.

The PCR machine takes 2~4 minutes to complete each cycle, and so on repeatedly, the DNA produced in each cycle can become the template for the next cycle, and each cycle amplifies the copy number of DNA specific region between two synthetic primers by 1-fold, and the PCR machine product amplifies rapidly in the exponential form of 2. After 25~30 cycles (2~3 hours), the PCR machine can theoretically amplify the Gen mere end 109 gange efter 25 ~ 30 runder (2 ~ 3 timer), og i praksis kan det generelt nå 106 ~ 107 gange.

Reaktionskinetik af PCR -maskinen

De tre reaktionstrin for PCR -maskinen gentages, hvilket resulterer i en eksponentiel stigning i mængden af DNA -amplifikation. Den endelige DNA -amplifikation af reaktionen kan beregnes ved anvendelse af y = (1+x) n. Y repræsenterer antallet af kopier af DNA -fragmentet amplificeret, X repræsenterer den gennemsnitlige amplifikationseffektivitet pr. Amplifikation, og N repræsenterer antallet af cyklusser. Den teoretiske værdi af den gennemsnitlige amplificeringseffektivitet er 100%, men i den tidlige fase af den faktiske reaktion er stigningen i målsekvensen DNA -fragment eksponentiel, og med den gradvise akkumulering af PCR -maskineprodukter øger det forstærkede DNA -fragment ikke længere eksponentielt, men det er gennemsnitligt, hvilket er i gennemsnit den lineære vækstperiode eller stationær periode, iee, den 'stagnationseffekt '. Effektiviteten af PCR -maskinen når ikke den teoretiske værdi.

Bioteke Corporation, der fokuserer på molekylær diagnostik og hurtig detektion, især på nukleinsyreekstraktion, er en professionel højteknologisk producent og PCR-maskiner. Det ligger i Wuxi City, Jiangsu -provinsen, Kina. Så vi ser frem til at samarbejde med dig.