Human papillomavirus (HPV) genotypningsdetektionssæt (fluorescens PCR -metode)

A. Påtegnet brug

• Dette sæt bruges til in vitro-kvalitativ detektion af højrisiko og lavrisiko-human papillomavirus (HPV).

• HPV med høj risiko inkluderer type 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82;  

• HPV med lav risiko inkluderer type 6,11,40,42,43,44/55,54,57/71,61,70,72,81,84.

B. Princip

• Dette reagens er et multiplex-fluorescerende sondebaseret TaqMan® QPCR-assay-system.

• Specifikke primere og sonder er designet til påvisning af forskellige typer human papillomavirus (HPV).

• Intern kontrol (IC) bruges som en overvågningsmetode for at undgå falske negative testresultater.

• UDG -enzym/DUTP -system tilsættes for at nedbryde amplifikationsproduktet for at undgå falske positive resultater.

• Dette sæt er et fuldt forblandet lyofiliseret system. TAQ-enzym, UDG-enzym, reaktionsbuffer, specifikke primere og sonder er blevet forudplaceret i reagenserne.

C. komponenter

Conponents	8 prøver/kit	24 prøver/sæt	Ingrediens
HP04 lyofiliseret reagens	8 × 8 strimmelrør	24 × 8 strimmelrør	Specifikke primer & sonder til påvisning af målpatogener, DNTP/DUTP -blanding, MG2+, TAC -polymerase og UDG -enzym
HPV -lysebuffer	1 ml × 1 rør	2,5 ml × 1 rør	Overfladeaktivt middel, afbalanceret saltopløsning
HPV -positiv kontrol	400 ml × 1 rør	400 ml × 1 rør	Plasmid indeholdende enhver målgensekvens
HPV -negativ kontrol	400 ml × 1 rør	400 ml × 1 rør	Plasmid indeholdende intern kontrolsekvens
Opløsning af opløsning	1 ml × 1 rør	1 ml × 3 rør	Stabilisator

D. Opbevaring og holdbarhed

1). Transport ved stuetemperatur under 37 ℃ (＜ 1 måned).

2). Opbevaret ved -20 ℃ ± 5 ℃ i 1 år.

3). Gentagen frysning og optøning bør ikke overstige 7 gange.

E.  Oversigt over testprocessen

F. PCR -amplifikation

1. Sæt reaktionsrørene i PCR -instrumentet, og indstil navnene på hver reaktion godt i den tilsvarende rækkefølge.

2. Vælg FAM, VIC/Hex, Rox og Cy5 Fire fluorescenskanaler til detektion. De tilsvarende mål for hver fluorescenskanal er vist i nedenstående tabel:

   
   

   
   

Beliggenhed	Fam	Vic/Hex	Rox	Cy5
Godt 1	HPV type 16	HPV type 18	HPV type 26	Intern kontrol (IC)
Nå 2	HPV type 31	HPV type 33	HPV type 35	HPV type 39
Godt 3	HPV type 45	HPV Type 51	HPV type 52	HPV Type 53
Godt 4	HPV Type 56	HPV type 58	HPV type 59	HPV type 68
Nå 5	HPV type 66	HPV Type 73	HPV type 82	HPV Type 81
Nå 6	HPV type 6	HPV type 11	HPV type 40	HPV type 42
Nå 7	HPV type 43	HPV Type 44/55	HPV Type 54	HPV type 61
Nå 8	HPV Type 57/71	HPV Type 70	HPV type 72	HPV type 84

G.  Resultatanalyse og fortolkning

Se brugervejledningen.

H. Performance Specifikation

1. Afsnit Begrænsning: 1000 eksemplarer/ml

2. Precision: variationskoefficienten (CV,%) af CT-værdien af inden for batch/mellem-batch-præcision ISen 5%.

3. Akkuration: Overensstemmelsesgraden for negativ/positiv reference: 100%.

4. Specificitet: Farget-organismerne var blevet analyseret i silico for potentiel krydsreaktivitet med primere eller sonde-sekvenser.

Homologi med andre arter er alle under 80%.

Specificitetsanalyse viste, at der ikke er nogen krydsreaktion med Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, chlamydia trachomatis, gardnerella vaginalis, haemophilus ducreyi, candida albicans, streptococcus agalactiae, urinoplasma urealyticum, ureaplasma parvum, mycococcus agalactiae, urinoplasma urolyticum, uraplasma parvum, mycoPlasma habinis, uroapasma urolyticum. Mycoplasma kønsorganer, Treponema pallidum, Herpes Simplex Virus Type 1 & 2.

I. Du kan godt lide